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    常用试剂的配制
    1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2 PBS
    • 试 剂
    • 质量/容量
    • NaH2PO4·2H2O
    • 0.39克
    • Na2HPO4
    • 1.27克
    • NaCl
    • 0.85克
    • NaN3
    • 200mg
    • H2O(蒸馏水)
    • 至 1000ml
    2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液pH7.4,PBST
    • 试 剂
    • 质量/容量
    • NaCl
    • 2.0克
    • KH2PO4
    • 0.2克
    • Na2HPO4·12H2O
    • 2.9克
    • KCl
    • 0.2克
    • NaN3
    • 0.2克
    • H2O
    • 至 1000ml
    • 吐温(Tween)20
    • 0.5ml
    • 注:4°C保存备用
    3、包被液(简称CB)pH9.6
    • 试 剂
    • 质量/容量
    • Na2CO3
    • 1.59克
    • NaHCO3
    • 2.93克
    • NaN3
    • 0.2克
    • H2O
    • 至 1000ml
    • 注:密封盖好,4°C存放备用
    4、ELISA底物液(可溶性底物)
    • 试 剂
    • 质量/容量
    • 磷酸-柠檬酸缓冲液 pH5.0
    • 0.1mol/L 柠檬酸(21.014克/100ml)
    • 24.3ml
    • 0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml)
    • 25.7ml
    • H2O
    • 50ml
    • 注:4°C存放备用
    5、DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)
    • 试 剂
    • 质量/容量
    • 0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL
    • Tris
    • 6.05克
    • HCL(36%)
    • 3.15克(约2.7ml浓HCL)
    • H2O
    • 至 1000ml
    • 注:DAB为3´,3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色
    6、DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)

    称DAB 30mg,用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用;

    使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。

    7、3′,3′,5′,5′,-四甲基联苯胺(TMB)溶液配制

    用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用;

    使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1% TMB溶液中,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。

    8、1%离子琼脂胶配制液

    作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。

    0.05U pH8.6 巴比妥钠-HCL缓冲液。

    • 试 剂
    • 质量/容量
    • 巴比妥钠
    • 23.8克
    • 1mol/L HCL
    • 34.5ml
    • H2O
    • 2150ml
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